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|本期目录/Table of Contents|

海南龙血树RAPD-PCR反应体系的优化

《广西植物》[ISSN:1000-3142/CN:45-1134/Q]

期数:
2011年01期
页码:
97-91
栏目:
植物生态学与生物地理学
出版日期:
2011-01-15

文章信息/Info

Title:
Optimization of RAPD-PCR reaction systemfor Dracaena cambodiana
作者:
郑道君 谢良商 张文 张治礼*
海南省农业科学院 农作物遗传育种重点实验室, 海口 571100
Author(s):
ZHENG Dao-Jun XIE Liang-Shang ZHANG Wen ZHANG Zhi-Li*
Key Laboratory of Crop Genetics and Breeding, Hainan Academy of Agricultural Sciences, Haikou 571100, China
关键词:
海南龙血树 RAPD 反应条件优化 有效引物筛选
Keywords:
Dracaena cambodiana RAPD optimization of reaction condition screening of effective primers
分类号:
-
DOI:
-
文献标识码:
A
摘要:
采用单因子试验和正交试验设计,对影响海南龙血树RAPD-PCR反应的模板DNA量、Mg2+、dNTP和引物浓度,Taq聚合酶用量等因子进行研究,分析各因子对RAPD-PCR扩增结果的影响,确立了海南龙血树RAPDPCR反应的最佳条件,即在25 μL反应体系中,包含10×buffer 2.5 μL,2.0 mmol/L MgCl2,300 μmol/L dNTPs,Taq酶1.5U,引物0.8 μmol/L和DNA模板20 ng。以此条件为基础,筛选出适用于海南龙血树RAPD-PCR分析的18条有效引物,为采用RAPD技术分析海南龙血树种群遗传变异水平和遗传结构打下了基础。
Abstract:
Both single factor test and orthogonal design were applied to study the effects of main factors on the RAPDPCR system for Dracaena cambodiana,in which the main factors included the content of template DNA,the concentration of Mg2+,dNTPs and primers and the content of Taq DNA polymerase,and an optimal 25μL RAPD-PCR reaction system for D.cambodiana was established,including 2.5 μL 10×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,300 μmol/L dNTPs,1.5 U Taq polymerase,0.8 μmol/L primers,and 20 ng DNA template. 18 primers were selected for RAPDPCR analysis for D.cambodiana using the optimized amplification system above,which can be employed for the analysis of genetic variation and structure of D.cambodiana population.

参考文献/References

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备注/Memo

备注/Memo:
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更新日期/Last Update: 2011-04-07