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|本期目录/Table of Contents|

怀地黄SRAP扩增体系的建立与引物的筛选

《广西植物》[ISSN:1000-3142/CN:45-1134/Q]

期数:
2010年02期
页码:
256-260
栏目:
植物生理学与分子生物学
出版日期:
2010-03-15

文章信息/Info

Title:
Establishment of SRAP amplification system for Rehmannia glutinosa and primer screening
作者:
周春娥谷凤平路淑霞段红英周延清*
河南师范大学 生命科学学院, 河南 新乡 453007
Author(s):
ZHOUChun-EGUFeng-PingLUShu-XiaDUANHong-YingZHOUYan-Qing*
College of Life Science, Henan Normal University, Xinxiang 453007, China
关键词:
怀地黄 分子标记 扩增体系优化 SRAP 引物的筛选
Keywords:
Rehmannia glutinosa molecular marker optimization of amplification protocol SRAP primer screening
分类号:
-
DOI:
-
文献标识码:
-
摘要:
为建立适合怀地黄SRAPPCR分子标记技术体系,通过单因子实验分别研究了DNA模板浓度、TaqDNA聚合酶浓度、Mg2+浓度、引物浓度以及dNTP浓度对怀地黄SRAP扩增反应的影响,确立了适合怀地黄SRAP最佳反应体系为:在25 μL的反应体系中,模板DNA量20 ng/25 μL、2.5 mmol/L Mg2+、0.32 μmol/L的上下游引物、0.30 μmol/L的dNTP以及2.5 U Taq酶,并利用确定的体系从88个引物组合中筛选出12对适合怀地黄SRAPPCR反应的引物。
Abstract:
The single factor design was used to optimize SRAP amplification system of 22 Rehmannia glutinosa lines in five factors(the concentration of template DNA,Taq DNA polymerase,primer,Mg2+and dNTP). SRAP amplification system was established as follows:2.5 mmol/L Mg2+,0.30 mmol/L dNTP mixture,2.5 U Taq DNA polymerase,0.32 μmol/L each primer,20 ng template DNA and 2.5 μL 10 X PCR buffer in 25 μL SRAP reaction system were the best suitable PCR system. 12 primers were collected from 88 primers using the optimized amplification system above.

参考文献/References

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备注/Memo

备注/Memo:
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更新日期/Last Update: 2010-04-29